天然和經過剝離的大鼠腸道在尤斯室中的活性和藥物滲透性的比較

【摘要】在藥物研發中，安裝在尤斯室中的大鼠腸道片段可用於(yu) 腸道滲透性的評估。通常，漿膜層和肌層會(hui) 事先去除，因為(wei) 這些被認為(wei) 是營養(yang) 物質和氧氣以及藥物擴散的障礙。然而，去除漿膜層和肌層的步驟，即剝離，是一個(ge) 技術挑戰過程，並可能導致組織損傷(shang) 和活性降低。本文，對安裝在尤斯室中的剝離和未剝離的大鼠小腸片段的活性進行了監測，對兩(liang) 種組織製備方法對一套測試化合物的表觀滲透性進行了測定。跨膜電壓（PD）用於(yu) 評估活性。本研究中，對於(yu) 大鼠的空腸片段，天然的（未剝離）和剝離的在初始PD（組織的健康狀態）和隨時間推移的PD（整個(ge) 實驗過程的活性）上沒有差別。整體(ti) 上，對於(yu) 研究中所用的化合物兩(liang) 種處理的組織在滲透性上也沒有顯著的差異。基於(yu) 這樣的結果，作者建議，在用尤斯室技術進行大鼠空腸滲透性研究中，剝離步驟可以去除。本文目的是研究對於(yu) 大鼠腸道在尤斯室的滲透性實驗中，實驗前的腸道剝離程序是否可以取消。用電參數對活性和完整性進行了評估（viability and integrity）。用一套帶有不同物理化學屬性的測試化合物評估了剝離與(yu) 否對滲透性的影響。

【討論】在ussing chamber實驗中，電參數通常被作為(wei) 組織膜活性和完整性的標誌。PD、R和SCC分別反映跨膜電壓梯度、組織完整性和跨膜離子通量。PD₀被預期反映製備過程中的剪切、處理，以及安裝步驟對組織活性的任何影響，這一點對於(yu) 剝離處理和天然未處理的兩(liang) 種組織片段沒有明顯不同。這表明，剝離程序沒有對組織產(chan) 生額外的、顯著的壓力，盡管對於(yu) 剝離的組織存在PD₀降低的趨勢。然而，兩(liang) 個(ge) 使用剝離組織的實驗沒有達到質量標準，而所有原生組織片段都被批準用於(yu) 研究，這表明剝離過程可能對腸段有負麵影響。

傳(chuan) 統上，漿膜-肌層被認為(wei) 降低了對組織的有效供氧和營養(yang) ，卻潛在地增加了細胞過程中形成的毒素的積累。本研究中，在150分鍾的實驗中，對於(yu) 剝離的和未剝離的天然組織片段，在活性上（ΔPD_%）沒有差別。因此，漿膜肌層看起來沒有限製氧氣和營養(yang) 的供給到對組織活性有明顯影響的水平。這些活性結果與(yu) 我們(men) 實驗室早先進行的試點研究的結果是一致的。另外，測得的電參數的範圍和變化和我們(men) 早先的報告是一致的，這進一步支持了從(cong) 本次呈現結果所得到的結論。

有趣的是，對於(yu) 所研究的物質，除雙氯芬酸（diclofenac）外，漿膜肌層對滲透性的測定沒有明顯的影響。

研究結果表明，對於(yu) 類藥性分子腸道滲透性的早期的藥物研究評價(jia) ，使用天然大鼠組織與(yu) 使用剝離的組織一樣合適。

【結論】

對於(yu) 天然的（未剝離）和剝離的大鼠空腸片段，在初始PD（組織的健康狀態）和隨時間推移的PD（整個(ge) 實驗過程的活性）上沒有差別。並且，兩(liang) 種組織製備方法在所用藥物混合物的滲透性上，除雙氯芬酸（diclofenac）外，看不出顯著的差別。

因此，用ussing chamber技術做大鼠小腸組織的滲透性研究時，剝離程序可以去除。剝離步驟去除後，由於(yu) 減少了組織製備的時間，zui小化了組織處理，從(cong) 而減少了組織損傷(shang) 的風險。這也增加了可用於(yu) 實驗的組織的數量，符合動物實驗3-R原則中的reduction和refinement.